人饑餓素 ghrelin ELISA試劑盒的基本知識
點擊次數(shù):1068 更新時間:2017-10-11
人饑餓素 ghrelin ELISA試劑盒的基本知識
| 產品中文: | 人饑餓素 (ghrelin) ELISA試劑盒 |
| 產品英文: | RAT IL-2 ELISA KIT |
| 規(guī)格: | 48T/96T |
| 保質期: | 6個月 |
| 保存條件: | 2到8度 |
| ELISA技術原理:以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來. |
| 1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。 |
| 2. 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。 |
| 3. 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。 |
| 4. 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記 的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。 |
| 5. 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。 |
| 6. 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量 與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定 性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),并且重復性好。 |
標本的保存: 人饑餓素 ghrelin ELISA試劑盒的基本知識 樣本處理及要求: | | 1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。 | 2. 血漿:應根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入 10 %( v/v )抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右 ( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。如有沉淀形 成,應再次離心。 | | 3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 | | 4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 | | 5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 | | 6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融. | | 7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 |
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一般說來,在 5 天內測定的標本可放置于 4℃,超過一周測定的需低溫凍存。 對收集后當天進行檢測的標本,儲存在 4 ℃ 備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。避免反復凍融。標本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時, -20 ℃ 可保存 1 個月。 -70 度可保存 6 個月。部分標 本也可加入適當防腐劑,激素類標本需添加抑肽酶。 人人饑餓素 ghrelin ELISA試劑盒的基本知識 ghrelin ELISA試劑盒的基本知識 |